Presencia de plaguicidas en fluidos y tejidos

Benzalquil dimetil amonio (o benzalconio; BAC), alquil trimetil amonio (ATMAC) y compuestos de dialquil dimetil amonio (DDAC) se han utilizado ampliamente durante más de seis décadas como desinfectantes, especialmente durante la pandemia de COVID-19. Aquí describimos métodos para la determinación de 7 BAC, 6 ATMAC, 6 DDAC, 8 metabolitos de BAC y los herbicidas de compuesto de amonio cuaternario (QAC) estructuralmente similares diquat, paraquat y difenzoquat en suero y orina humana utilizando cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS). Los métodos se optimizaron utilizando estándares internos marcados isotópicamente y extracción en fase sólida con cartuchos de intercambio catiónico débil. Se separaron diquat y paraquat cromatográficamente utilizando una columna de LC de modo mixto, y BAC, ATMAC, DDAC, difenzoquat y metabolitos de BAC utilizando columnas de LC de fase reversa (C8 y C18). Los límites de detección (LOD) y de cuantificación (LOQ) del método fueron de 0.002-0.42 y 0.006-1.40 ng/mL, respectivamente. Las recuperaciones de todos los analitos fortificados a concentraciones de 1, 5 y 20 ng/mL en matrices de suero y orina fueron del 61 al 129%, con desviaciones estándar del 0 al 20%. El análisis repetido de muestras de suero y orina fortificadas de manera similar mostró variaciones intra-día e inter-día del 0.22 al 17.4% y del 0.35 al 17.3%, respectivamente. Los efectos de matriz para los analitos adicionados a las matrices de suero y orina variaron del -27% al 15.4%. El análisis de muestras reales de orina y suero reveló la presencia de varios QAC en el suero humano. Aunque no se encontraron BAC parentales en la orina, detectamos, por primera vez, varios metabolitos de ácido ω-hidroxi y ω-carboxílico de BAC a concentraciones promedio en el rango de 0.05-0.35 ng/mL. El método desarrollado es adecuado para su aplicación en el biomonitoreo a gran escala de la exposición humana a QAC y sus metabolitos en suero y orina humana.

Benzalkyldimethylammonium (or benzalkonium; BACs), alkyltrimethylammonium (ATMACs), and dialkyldimethylammonium compounds (DDACs) have been widely used for over six decades as disinfectants, especially during the COVID-19 pandemic. Here we describe methods for the determination of 7 BACs, 6 ATMACs, 6 DDACs, 8 BAC metabolites, and the structurally similar quaternary ammonium compound (QAC) herbicides diquat, paraquat, and difenzoquat in human serum and urine using liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS). The methods were optimized using isotopically labelled internal standards and solid-phase extraction with weak cation-exchange cartridges. We separated diquat and paraquat chromatographically using a mixed-mode LC column, and BACs, ATMACs, DDACs, difenzoquat, and BAC metabolites using reversed-phase (C8 and C18) LC columns. Method limits of detection (MLODs) and quantification (MLOQs) were 0.002–0.42 and 0.006–1.40 ng/mL, respectively. Recoveries of all analytes fortified at 1, 5, and 20 ng/mL concentrations in serum and urine matrices were 61–129%, with standard deviations of 0–20%. Repeated analysis of similarly fortified serum and urine samples yielded intra-day and inter-day variations of 0.22–17.4% and 0.35–17.3%, respectively. Matrix effects for analytes spiked into serum and urine matrices ranged from –27% to 15.4%. Analysis of real urine and serum samples revealed the presence of several QACs in human serum. Although no parent BACs were found in urine, we detected, for the first time, several ω-hydroxy and ω-carboxylic acid metabolites of BACs at average concentrations in the range of 0.05–0.35 ng/mL. The developed method is suitable for application in large-scale biomonitoring of human exposure to QACs and their metabolites in human serum and urine.

Antecedentes: Teniendo en cuenta el modelo de desarrollo adoptado en la agricultura brasileña, que se basa en la creciente demanda de productos químicos, los estudios que analizan el impacto del uso de pesticidas son relevantes para medir los desarrollos en las poblaciones afectadas. Objetivo: El objetivo de este estudio fue realizar una revisión de literatura utilizando la plataforma digital, buscando publicaciones científicas de 2009 a 2019 sobre la exposición de mujeres embarazadas a pesticidas. Métodos: Utilizamos PubMed para buscar artículos científicos publicados entre el 1 de enero de 2009 y el 31 de diciembre de 2019, relacionados con la exposición de mujeres embarazadas a pesticidas en áreas rurales. Resultados: Inicialmente, se seleccionaron 207 publicaciones considerando los títulos y resúmenes. Se excluyeron trabajos literarios que no cumplían con los criterios de inclusión. Después de la selección, quedaron 15 estudios. Según las publicaciones sobre la exposición de mujeres embarazadas a pesticidas en áreas rurales de 2009 a 2019, se encontró que el daño causado por la exposición a pesticidas a la salud de las mujeres embarazadas y sus bebés incluye problemas en el aumento de peso gestacional, parto prematuro, bajo peso al nacer, presencia de pesticidas en la sangre tanto de la madre como del recién nacido, presencia de pesticidas agrícolas en el córtex cerebral del feto y abortos espontáneos. Conclusión: Se necesitan estudios prospectivos futuros a nivel individual para evaluar mejor el impacto potencial de la exposición a pesticidas en la salud de mujeres embarazadas y recién nacidos.

Background: Considering the development model adopted in Brazilian agriculture, which is based on the increasing demand for chemicals, studies that analyze the impact of pesticide use are relevant to measure the developments in affected populations. Objective: The aim of this study was to conduct a literature review using the digital platform, searching for scientific publications from 2009–2019 on exposure of pregnant women to pesticides. Methods: We used PubMed to search for scientific articles published between January 1, 2009, and December 31, 2019, and related to exposure of pregnant women to pesticides in rural areas. Results: Initially, 207 publications were selected considering the titles and abstracts. Literature works that did not meet the inclusion criteria were excluded. After selection, 15 studies remained. According to the publications on the exposure of pregnant women to pesticides in rural areas from 2009 to 2019, it was found that the damage caused by pesticide exposure to the health of pregnant women and their babies includes problems in gestational weight gain, premature birth, low birth weight, presence of pesticides in blood of both mother and newborn, presence of agricultural pesticides in the cerebral cortex of fetus, and miscarriages. Conclusion: Future prospective studies at individual level are needed to better assess the potential impact of pesticide exposure on the health of pregnant women and newborns.

Existe una considerable controversia respecto a la genotoxicidad del glifosato (N-(fosfonometil glicina). Se ha sugerido quela genotoxicidad de este herbicida aumenta por los adyuvantes añadidos a las formulaciones comerciales basados en glifosato. El efecto de varias concentraciones de glifosato y de tres herbicidas comerciales basados en glifosato (GBH) en linfocitos humanos fueron evaluados. Las células humanas sanguíneas fueron expuestas a glifosato de 0.1, 1, 10 y 50 mM así como a las concentraciones equivalentes de glifosato en formulaciones comerciales. El daño genético (p < 0.05) fue observado en todas las concentraciones con glifosato y con formulaciones de FAENA y TACKLE. Estas dos formulaciones comerciales mostraron genotoxicidad que eran dependientes de la concentración, pero en una alta proporción comparado únicamente con el glifosato puro. Las altas concentraciones de glifosato aumentaron la frecuencia y el rango de longitudes de cola de algunos grupos migratorios, y lo mismo fue observado para FAENA Y TACKLE, mientras con CENTELLA el rango de migración disminuyó, pero la frecuencia de grupos migratorios aumentó. Mostramos que el glifosato puro y el GBH comercial (FAENA, TACKLE y CENTELLA) dio señales de genotoxicidad en muestras sanguíneas humanas en el ensayo cometa. La genotoxicidad aumentó en las formulaciones, indicando una actividad genotóxica también en los adyuvantes de estos productos. El uso del parámetro MG nos permitió detectar a un cierto tipo de daño genético con formulaciones diferentes.

There is considerable controversy regarding the genotoxicity of glyphosate (N-(phosphonomethyl) glycine). It has been suggested that the genotoxicity of this herbicide is increased by the adjuvants added to commercial formulations based on glyphosate. The effect of various concentrations of glyphosate and three commercial glyphosate-based herbicides (GBH) on human lymphocytes was evaluated. Human blood cells were exposed to glyphosates of 0.1, 1, 10 and 50 mM as well as to equivalent concentrations of glyphosate on commercial formulations. Genetic damage (p < 0.05) was observed in all concentrations with glyphosate and with FAENA and TACKLE formulations. These two commercial formulations showed genotoxicity that was concentration-dependent but in a higher proportion compared to pure glyphosate only. Higher glyphosate concentrations increased the frequency and range of tail lengths of some migration groups, and the same was observed for FAENA and TACKLE, while in CENTELLA the migration range decreased but the frequency of migration groups increased. We show that pure glyphosate and commercial GBH (FAENA, TACKLE and CENTELLA) gave signals of genotoxicity in human blood samples in the comet assay. The genotoxicity increased in the formulations, indicating genotoxic activity also in the added adjuvants present in these products. The use of the MG parameter allowed us to detect a certain type of genetic damage associated with different formulations.

Los herbicidas son la clase de pesticidas más usados a nivel mundial, y los repelentes contra insectos son ampliamente utilizados a nivel mundial. Sin embargo, existe una escasez de estudios caracterizando las a asociaciones entre estos grupos químicos y el neurocomportamiento humano. Estudios experimentales sugieren que los herbicidas glifosato y ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) pueden afectar el neurocomportamiento y las vías colinérgicas y glutamatérgicas en el cerebro. Nuestro propósito es evaluar si los herbicidas y repelentes contra insectos están asociados con el desempeño neuroconductual en adolescentes. Evaluamos a 519 participantes (entre 11 -17 años de edad) que vivían en comunidades agrícolas en Ecuador. Cuantificamos concentraciones en orina de glifosato, 2,4-D y dos metabolitos repelentes de insectos N,N-dietil-meta-toluamida (DEET) [ácido 3-(dietilcarbamoil)benzoico (DCBA) y ácido 3-(etilcarbamoil)benzoico ( ECBA)] utilizando espectrometría de masas por dilución de isótopos. Evaluamnos el desempeño neuroconductual mediante 9 subpruebas en 5 dominios (atención/control inhibitorio, memoria/aprendizaje, lenguaje, procesamiento visuoespacial y percepción social). Caracterizamos las asociaciones usando ecuaciones de estimación generalizadas e imputación para metabolitos por debajo de los límites de detección. Los modelos fueron ajustados por características demográficas y antropométricas, creatinina urinaria, y maduración sexual. Mediación por cortisol salival, dehidroepiandrosterona, 17β-estradiol, y testosterona se evaluó mediante modelos de ecuaciones estructurales. La media de la puntuación de cada dominio neuroconductual fue entre 7.0 y 8.7 [rango de desviación estándar (DE): 2.0-2.3]. El glifosato fue detectado en 98.3% de los participantes, 2,4-D en el 66.2%, DCBA en el 63.3%, y ECBA en el 33.4%. 2,4-D se asoció negativamente con todos los dominios neuroconductuales, pero se observaron asociaciones estadísticamente significativas con la atención/inhibición [diferencia de puntuación por concentración de metabolito 50% mayor(b)=−0.19 Intervalo de confianza (IC) del 95%:−0.31,−0.07 idioma [b=−0.12 (IC 95%:−0.23,−0.01)], y memoria/aprendizaje [b=−0.11 (IC 95%:−0.22, 0.01)]. El glifosato tuvo una asociación negativa estadísticamente significativa solo con la percepción social [β=−0.08 (95% CI: −0.14, −0.01)]. Los metabolitos DDET no fueron asociados con el desempeño neuroconductual. No se observó mediación por género y hormonas suprarrenales. Este estudio describe un peor desempeño neuroconductual asociado con la exposición a herbicidas en adolescentes, particularmente con 2,4-D. Es necesaria la replicación de estos hallazgos en otras poblaciones pediátricas y adultas.

Background: Herbicides are the most used class of pesticides worldwide, and insect repellents are widely used globally. Yet, there is a dearth of studies characterizing the associations between these chemical groups and human neurobehavior. Experimental studies suggest that glyphosate and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) herbicides can affect neurobehavior and the cholinergic and glutamatergic pathways in the brain. We aim to assess whether herbicides and insect repellents are associated with neurobehavioral performance in adolescents. Methods: We assessed 519 participants (11-17 years of age) living in agricultural communities in Ecuador. We quantified urinary concentrations of glyphosate, 2,4-D, and two N,N-diethyl-meta-toluamide (DEET) insect repellent metabolites [3-(diethylcarbamoyl)benzoic acid (DCBA) and 3-(ethylcarbamoyl)benzoic acid (ECBA)] using isotope-dilution mass spectrometry. We assessed neurobehavioral performance using 9 subtests across 5 domains (attention/inhibitory control, memory/learning, language, visuospatial processing, and social perception). We characterized the associations using generalized estimating equations and multiple imputation for metabolites below detection limits. Models were adjusted for demographic and anthropometric characteristics, urinary creatinine, and sexual maturation. Mediation by salivary cortisol, dehydroepiandrosterone, 17β-estradiol, and testosterone was assessed using structural equation modeling. Results: The mean of each neurobehavioral domain score was between 7.0 and 8.7 [standard deviation (SD) range: 2.0-2.3]. Glyphosate was detected in 98.3% of participants, 2,4-D in 66.2%, DCBA in 63.3%, and ECBA in 33.4%. 2,4-D was negatively associated with all neurobehavioral domains, but statistically significant associations were observed with attention/inhibition [score difference per 50% higher metabolite concentration (β)=−0.19 95% confidence interval (CI): −0.31, −0.07], language [β=−0.12 (95% CI: −0.23, −0.01)], and memory/learning [β=−0.11 (95% CI: −0.22, 0.01)]. Glyphosate had a statistically significant negative association only with social perception [β=−0.08 (95% CI: −0.14, −0.01)]. DEET metabolites were not associated with neurobehavioral performance. Mediation by gender and adrenal hormones was not observed. Conclusion: This study describes worse neurobehavioral performance associated with herbicide exposures in adolescents, particularly with 2,4-D. Replication of these findings among other pediatric and adult populations is needed. https://doi.org/10.1289/EHP11383.

Los herbicidas a base de glifosato (GBH), que contienen glifosato como componente actico, son extensamente utilizados a nivel mundial. Han surgido preocupaciones sobre su riesgo potencial para los humanos, ya que se ha detectado glifosato en fluidos corporales humanos. Las controversias actuales rodean las propiedades de alteración endocrina y la herencia transgeneracional de enfermedades y epimutaciones de la línea germinal resultantes de la exposición a GBH y glifosato. Esta revisión discute la evidencia de estudios in vitro, in vivo y clínicos sobre su impacto en la regulación de las hormonas sexuales y el sistema reproductivo. La evidencia sugiere que actúan como sustancias químicas disruptoras endocrinas, que alteran los niveles de hormonas sexuales. Mecánicamente, interfieren con las vías de señalización hormonal al alterar las proteínas involucradas en el transporte y el metabolismo hormonal. Se han observado cambios patológicos en los sistemas reproductivos masculinos y femeninos, que potencialmente conducen a toxicidad reproductiva. La exposición prenatal puede conducir a la herencia transgeneracional de patologías y epimutaciones de los espermatozoides. Sin embargo, debido a la complejidad de las formulaciones de glifosato que contienen adyuvantes, identificar los componentes de mayor riesgo en la exposición ambiental se vuelve un desafío.

Glyphosate-based herbicides (GBHs) containing glyphosate as the active component are extensively used worldwide. Concerns have arisen about their potential risk to human, as glyphosate has been detected in human body fluids. Current controversies surround the endocrine-disrupting properties and transgenerational inheritance of diseases and germline epimutations resulting from exposure to GBHs and glyphosate. This review discusses evidence from in vitro, in vivo, and clinical studies on their impact on sex hormone regulation and reproductive system. Evidence suggests that they act as endocrine-disrupting chemicals, which altering sex hormone levels. Mechanistically, they interfere with hormone signaling pathways by disrupting proteins involved in hormone transport and metabolism. Pathological changes have been observed in male and female reproductive systems, potentially leading to reproductive toxicity. Prenatal exposure may lead to transgenerational inheritance of pathologies and sperm epimutations. However, due to the complexity of glyphosate formulations containing adjuvants identifying higher risk components in environmental exposure becomes challenging.

Loa problemas de salud asociados con glifosato (GLY) han recibido un aumento en la atención recientemente. Sin embargo, sus posibles efectos tóxicos vasculares en poblaciones ocupacionalmente expuestas aún no están claros. Este estudio evaluó los efectos del GLY en las células del músculo liso vascular aórtico humano (HAVSMC), y la relación entre GLY y la aterosclerosis. Los resultados demostraron que el GLY induce una morfología celular relativamente más grande y aplanada, que es típica de la senescencia celular y promueve la actividad de la β-galactosidasa asociada a la senescencia, así como la expresión de las proteínas p53, p21 y p16 en HAVSMC. Con respecto a los efectos tóxicos, GLY induce la acumulación de especies reactivas de oxígeno, daño al DNA, y daño mitocondrial en HAVSMCs. Mecánicamente, la vía de la proteína 1 asociada a ECH tipo Kelch-factor 2 relacionado con el eritroide 2 nuclear se activa en respuesta al estrés oxidativo producido por GLY. En un modelo in vivo, GLY En un modelo in vivo, GLY provocó dislipidemia y reclutamiento de macrófagos en la vasculatura del pez cebra. En conlusión, nuestros resultados demostraron que el GLY induce toxicidad vascular y puede ser un riesgo potencial de aterosclerosis. Estos hallazgos, resaltan la necesidad de preocuparse sobre el riesgo cardiovascular en poblaciones ocupacionales crónicamente expuestas a GLY.

The health risks associated with glyphosate (GLY) have recently received increasing attention. However, its potential vascular toxic effects in occupationally exposed populations remain unclear. This study assessed the effects of GLY on human aortic vascular smooth muscle cells (HAVSMCs) and the relationship between GLY and atherosclerosis. The results demonstrate that GLY induces a relatively larger and more flattened cell morphology, which is typical of cellular senescence and promotes senescence-associated β-galactosidase activity, as well as the expression of p53, p21, and p16 proteins in HAVSMCs. Regarding toxic effects, GLY induces the accumulation of reactive oxygen species, DNA damage, and mitochondrial damage in HAVSMCs. Mechanistically, the nuclear factor erythroid 2-related factor 2–Kelch-like ECH-associated protein 1 pathway is activated in response to oxidative stress produced by GLY. In an in vivo model, GLY led to dyslipidemia and macrophage recruitment in zebrafish vasculature. In conclusion, our results demonstrate that GLY induces vascular toxicity and may be a potential risk for atherosclerosis. These findings highlight the need for concern about cardiovascular risk in occupational populations chronically exposed to GLY.

El glifosato es un herbicida sistémico, no selectivo, pre y post emergencia de amplio espectro. En 2015, la IARC clasificó al glifosato como “un probable agente cancerígeno para los seres humanos”. El objetivo de este estudio era evaluar la citotoxicidad y genotoxicidad de la formulación comercial del glifosato (Roundup® Control Max) en concentraciones ambientales relevantes y medir el efecto potencial de este herbicida sobre la capacidad de la célula para reparar daños en el ADN. Las células HEK293 fueron expuestas a 5 concentraciones de Roundup® Control Max equivalentes a to 0.7; 7; 70; 700 and 3,500 μg/L glyphosate acid, por 1, 4 y 24 h. La citotoxicidad se cuantificó mediante el método de tinción con Azul de Tripán y mediante el ensayo MTT, mientras que la genotoxicidad y la evaluación de la cinética de reparación del daño del ADN se analizaron mediante el ensayo del cometa alcalino. En todos los tratamientos, la viabilidad de las células fue más alta que el 80%. Las tres mayores concentraciones de glifosato - 70 μg/L, 700 μg/L, y 3,500 μg/L – aumentaron los niveles de daños al DNA en comparación con el control en los tres tiempos de exposición probados. Finalmente, en cuanto a la cinética de reparación del daño en el ADN, las células expuestas inicialmente a 3500 μg/L de glifosato durante 24 h fueron incapaces de reparar las roturas en las cadenas de ADN incluso después de 4 h de incubación en medio de cultivo. El presente estudio demostró por primera vez que Roundup® Control Max puede inducir daños genéticos y causar alteraciones en el sistema de reparación del ADN en células de riñón embrionario humano incluso a las concentraciones encontradas en sangre y leche materna de personas expuestas a través de residuos del herbicida en alimentos, valores que han sido poco evaluados o aún no han sido estudiados según la bibliografía existente.

Glyphosate is a systemic, non-selective, pre and post-emergence wide range herbicide. In 2015, IARC classified Glyphosate as "a probable carcinogenic agent for humans". The aim of this study was to evaluate the cytotoxicity and genotoxicity of the commercial formulation of glyphosate (Roundup® Control Max) at environmentally relevant concentrations and measure the potential effect of this herbicide over the cell capacity to repair DNA damage. HEK293 cells were exposed to 5 concentrations of Roundup® Control Max equivalent to 0.7; 7; 70; 700 and 3,500 μg/L glyphosate acid, for 1, 4 and 24 h. Cytotoxicity was quantified by the Trypan Blue staining method and by the MTT assay, while genotoxicity and evaluation of DNA damage repair kinetics were analyzed through the alkaline comet assay. In all treatments, cell viability was higher than 80%. The three highest glyphosate concentrations-70 μg/L, 700 μg/L, and 3,500 μg/L-increased levels of DNA damage compared to the control at the three exposure times tested. Finally, concerning the kinetics of DNA damage repair, cells initially exposed to 3,500 μg/L of glyphosate for 24 h were unable to repair the breaks in DNA strands even after 4 h of incubation in culture medium. The present study demonstrated for the first time that Roundup® Control Max may induce genetic damage and cause alterations in the DNA repair system in human embryonic kidney cells even at concentrations found in blood and breast milk of people exposed through residues of the herbicide in food, which values have been poorly assessed or not studied yet according to the existent literature.

Interferencia del glifosato en la organización folicular del lagarto de pared Podarcis siculus.

Glyphosate (Gly) is a broad-spectrum herbicide widely used thanks to its high efficiency and low toxicity. However, evidence exists of its toxic effects on non-target organisms. Among these, the animals inhabiting agricultural fields are particularly threatened. Recent studies demonstrated that exposure to Gly markedly affected the morphophysiology of the liver and testis of the Italian field lizard Podarcis siculus. The present study aimed to investigate the effects of the herbicide on the female reproductive system of this lizard in order to have a full picture of Gly-induced reproductive impairment. The animals were exposed to 0.05 and 0.5 μg/kg of pure Gly by gavage for 3 weeks. The results demonstrated that Gly, at both doses tested, profoundly interfered with ovarian function. It induced germ cells’ recruitment and altered follicular anatomy by anticipating apoptotic regression of the pyriform cells. It also induced thecal fibrosis and affected oocyte cytoplasm and zona pellucida organizations. At the functional levels, Gly stimulated the synthesis of estrogen receptors, suggesting a serious endocrine-disrupting effect. Overall, the follicular alterations, combined with those found at the level of the seminiferous tubules in males, suggest serious damage to the reproductive fitness of these non-target organisms, which over time could lead to a decline in survival.

El objetivo de este estudio fue verificar la presencia de glifosato en la leche materna y caracterizar la exposición ambiental materna. Se recolectaron 67 muestras de leche de mujeres lactantes de la ciudad de Francisco Beltrão, Paraná, residentes en áreas urbanas (n=26) y rurales (n=41), en el pico de aplicación de glifosato en cultivos de maíz y soja en la región (abril y mayo de 2018). Para caracterizar la población de estudio, se recogieron datos socioepidemiológicos de las mujeres. Para determinar los niveles de glifosato, se utilizó un kit comercial de ensayo inmunoabsorbente enzimático. Se detectó glifosato en todas las muestras de leche materna analizadas con un valor medio de 1,45 µg.

The aim of this study was to verify the presence of glyphosate in breast milk and to characterize maternal environmental exposure. Sixty-seven milk samples were collected from lactating women in the city of Francisco Beltrão, Paraná, living in urban (n=26) and rural (n=41) areas, at the peak of glyphosate application in corn and soy crops in the region (April and May 2018). To characterize the study population, socio-epidemiological data of the women were collected. To determine glyphosate levels, a commercial enzyme immunosorbent assay kit was used. Glyphosate was detected in all breast milk samples analyzed with a mean value of 1.45 µg/L. Despite some descriptive differences, there were no statistically significant differences (P<0.05) between the categories of the variables tested. Also, glyphosate was detected in drinking water samples from the urban area and in artesian well water from the rural area of the region where the studied population lived. The estimation of the total amount of glyphosate ingested by breastfeeding babies in a period of 6 months was significant. These results suggest that the studied lactating population was contaminated with glyphosate, possibly through continued environmental exposure.

Las plantas productoras de heno, el concentrado, la paja y las praderas podrían contaminarse con los aerosoles de herbicidas a base de glifosato durante el proceso de pulverización de los cultivos y el tratamiento de desecación de los cereales antes de la cosecha. El objetivo de este estudio es investigar la concentración de glifosato en el fluido duodenal de caballos con síndrome de úlcera gástrica. El estómago y el duodeno de pacientes equinos derivados sin tratamiento (n=92) con cólicos, pérdida de peso, diarrea, anemia o intolerancia al rendimiento, fueron examinados endoscópicamente justo después de la admisión. Se recogió líquido duodenal (40 ml) de la región duodenal donde se encuentra la papila duodenal mayor. Se examinaron datos de hematología y química clínica. La concentración de glifosato en suero y las muestras de fluido duodenal se analizaron mediante un ELISA competitivo y se realizaron análisis de control con HPLC. Las diferencias estadísticas entre los grupos se determinaron mediante la prueba no paramétrica de Mann-Whitney utilizando un nivel de significancia de p≤0,05. Se detectó glifosato en todo el fluido duodenal (mediana 12,2 ng/ml; 1er cuartil 4,0 ng/ml; 3er cuartil 19,3 ng/ml; min 0,6 ng/ml; máx. 192,9 ng/ml) y en muestras de sangre (1,79 ng/ml; 1,0 ng/ml; 2,8 ng/ml; 0,2 ng/ml; 3,7 ng/ml) de todos los caballos. Las concentraciones de glifosato de muestras de líquido duodenal son significativamente mayores que en muestras de sangre (Mann Whitney U-test, p≤0,05). La concentración de glifosato en el líquido duodenal fue significativamente mayor en caballos con enfermedad gástrica escamosa (grado 4/4; n=11/92) en comparación con caballos con mucosa escamosa normal (grado 0/4, n=10/92) (mediana: 19,8 ng/ml frente a 8,4 ng/ml). Los caballos con enfermedad gástrica glandular y un grado 4/4 (n=9/92) tenían mayor concentraciones de glifosato en el fluido duodenal que caballos con mucosa glandular normal (grado 0/4; n=9/92) (mediana: 19,2 frente a 11,1). La actividad de la enzima Gamma-Glutamiltransferasa (GGT) es significativamente mayor en el grupo de caballos con menor concentración de glifosato en el líquido duodenal (≤12,2 ng/ml) en comparación con el grupo con mayor concentración de glifosato (>12,2 ng/ml) (mediana 279,5 frente a 101,9 U/L). Durante el otoño los caballos tenían concentraciones más altas de glifosato en el fluido duodenal (n=18; mediana 14,3) en comparación con concentraciones más bajas en primavera (n=34; mediana 8,1 ng/ml). Los caballos que vivían en las grandes ciudades tenían concentraciones significativamente más altas de glifosato en el líquido duodenal en comparación con los caballos que vivían en el campo (medias de 17,8 ng/ml frente a 7,5 ng/ml).

The hay producing plants, concentrate, straw and meadows could be contaminated by the aerosols of glyphosate based herbicide during spraying process of crops and pre-harvest desiccation treatment of cereals. The aim of this study is to investigate the concentration of glyphosate in the duodenal fluid of horses with gastric ulcer syndrome. The stomach and duodenum of referred untreated horse patients (n=92) with colic, weight loss, diarrhoea, anemia or performance intolerance were endoscopically examined right after the admission. Duodenal fluid (40 ml) was collected from the duodenal region where the papilla duodeni major is located. Hematology and clinical chemistry data were examined. The concentration of glyphosate in serum and duodenal fluid samples were analysed using a competitive ELISA and control analysis had also been done with HPLC. Statistical differences between groups were determined by the non-parametric Mann-Whitney-test using a significant level of p≤0,05. Glyphosate was detected in all duodenal fluid (median 12,2 ng/ml; 1st quartile 4,0 ng/ml; 3rd quartile 19,3 ng/ml; min 0,6 ng/ml; max. 192,9 ng/ml) and blood samples (1,79 ng/ml; 1,0 ng/ml; 2,8 ng/ml; 0,2 ng/ml; 3,7 ng/ml) of all horses. Glyphosate concentrations of duodenal fluid samples are significantly higher than in blood samples (Mann Whitney U-test, p≤0,05). The concentration of glyphosate in the duodenal fluid was significantly higher in horses with squamous gastric disease (grade 4/4; n=11/92) compared to horses with normal squamous mucosa (grade 0/4, n=10/92) (median: 19,8 ng/ml versus 8,4 ng/ml). Horses with glandular gastric disease and a grade 4/4 (n=9/92) had higher concentrations of glyphosate in the duodenal fluid than horses with normal glandular mucosa (grade 0/4; n=9/92) (median: 19,2 versus 11,1). The Gamma-Glutamyltransferase (GGT) enzyme activity is significantly higher in the group of horses with lower concentration of glyphosate in the duodenal fluid (≤12,2 ng/ml) compared with the group with higher concentration of glyphosate (>12,2 ng/ml) (median 279,5 versus 101,9 U/L). During autumn the horses had higher concentrations of glyphosate in duodenal fluid (n=18; median 14,3) compared with lower concentrations in spring time (n=34; median 8,1 ng/ml). Horses kept around big cities had significantly higher concentrations of glyphosate in the duodenal fluid in comparison to horses living in the countryside (medians 17,8 ng/ml versus 7,5 ng/ml).