Presencia de plaguicidas en fluidos y tejidos

Antecedentes. El glifosato es el herbicida más utilizado en EE.UU. y en todo el mundo. Ha habido un debate considerable sobre su carcinogenicidad. Los estudios epidemiológicos sugieren que el mieloma múltiple (MM) y el linfoma no Hodgkin (LNH) presentan una asociación positiva y estadísticamente significativa con la exposición al glifosato. Como mutador del genoma de las células B, la citidina deaminasa inducida por activación (AID) es un agente patogénico clave tanto en el MM como en el LNH de células B. Métodos. Vk*MYC es una línea de ratón con activación esporádica de MYC en las células B del centro germinal y se considera el mejor modelo animal de MM disponible. Tratamos ratones Vk*MYC y ratones de tipo salvaje con agua potable que contenía 1000 mg/L de glifosato y examinamos a los animales después de 72 semanas. Resultados. Los ratones Vk*MYC expuestos al glifosato desarrollaron anomalías hematológicas progresivas y neoplasias de células plasmáticas, como esplenomegalia, anemia e IgG sérica elevada. Además, el glifosato causó disfunción orgánica múltiple, incluidas lesiones óseas líticas y daño renal en ratones Vk*MYC. Los ratones de tipo salvaje tratados con glifosato desarrollaron una gammapatía monoclonal benigna con aumento de IgG sérica, anemia y presencia de células plasmáticas en el bazo y la médula ósea. Por último, el glifosato incrementó la AID en el bazo y la médula ósea de los ratones de tipo salvaje y Vk*MYC. Conclusiones. Estos datos apoyan al glifosato como un factor ambiental para MM y potencialmente para NHL e implican un mecanismo subyacente a la especificidad de las células B de la carcinogénesis inducida por glifosato observada epidemiológicamente.

Background. Glyphosate is the most widely used herbicide in the USA and worldwide. There has been considerable debate about its carcinogenicity. Epidemiological studies suggest that multiple myeloma (MM) and non-Hodgkin lymphoma (NHL) have a positive and statistically significant association with glyphosate exposure. As a B cell genome mutator, activation-induced cytidine deaminase (AID) is a key pathogenic player in both MM and B cell NHL. Methods. Vk*MYC is a mouse line with sporadic MYC activation in germinal center B cells and considered as the best available MM animal model. We treated Vk*MYC mice and wild-type mice with drinking water containing 1000 mg/L of glyphosate and examined animals after 72 weeks. Results. Vk*MYC mice under glyphosate exposure developed progressive hematological abnormalities and plasma cell neoplasms such as splenomegaly, anemia, and high serum IgG. Moreover, glyphosate caused multiple organ dysfunction, including lytic bone lesions and renal damage in Vk*MYC mice. Glyphosate-treated wild-type mice developed benign monoclonal gammopathy with increased serum IgG, anemia, and plasma cell presence in the spleen and bone marrow. Finally, glyphosate upregulated AID in the spleen and bone marrow of both wild-type and Vk*MYC mice. Conclusions. These data support glyphosate as an environmental risk factor for MM and potentially NHL and implicate a mechanism underlying the B cell-specificity of glyphosate-induced carcinogenesis observed epidemiologically.

Nosotros desarrollamos un puntaje de carga de residuos de pesticidas (PRBS) basado en un cuestionario de frecuencia de alimentos y datos de vigilancia sobre residuos de pesticidas en alimentos para caracterizar la exposición dietética durante el último año. En el presente estudio, evaluamos la asociación de PRBS con concentraciones urinarias de biomarcadores de plaguicidas. El consumo de frutas y verduras (FV) se clasificó como alto (PRBS≥4) o bajo (PRBS<4) en residuos de pesticidas para 90 hombres del estudio EARTH. Se analizaron dos muestras de orina por hombre para siete biomarcadores de insecticidas organofosforados y piretroides, y el herbicida ácido 2,4-diclorofenoxiacético. Usamos ecuaciones de estimación generalizadas para analizar la asociación de PRBS con concentraciones urinarias de biomarcadores de pesticidas. Las concentraciones urinarias de biomarcadores de pesticidas se relacionaron positivamente con la ingesta alta de FV de pesticidas, pero se relacionaron inversamente con la ingesta baja de FV de pesticidas. La suma molar de las concentraciones urinarias de biomarcadores de plaguicidas fue un 21 % (intervalo de confianza (IC) del 95 %: 2 %, 44 %) mayor por cada porción/día de aumento en la ingesta alta de FV de plaguicidas, y un 10 % (IC del 95 %: 1 %, 18%) más bajo por cada aumento de una porción/día en la ingesta baja de pesticidas FV. Además, la ingesta de FV altos en pesticidas se relacionó positivamente con la mayoría de los biomarcadores urinarios individuales. Nuestros hallazgos respaldan la utilidad del enfoque PRBS para caracterizar la exposición dietética a pesticidas seleccionados.

We developed a pesticide residue burden score (PRBS) based on a food frequency questionnaire and surveillance data on food pesticide residues to characterize dietary exposure over the past year. In the present study, we evaluated the association of the PRBS with urinary concentrations of pesticide biomarkers. Fruit and vegetable (FV) intake was classified as having high (PRBS≥4) or low (PRBS<4) pesticide residues for 90 men from the EARTH study. Two urine samples per man were analyzed for seven biomarkers of organophosphate and pyrethroid insecticides, and the herbicide 2,4-dichlorophenoxyacetic acid. We used generalized estimating equations to analyze the association of the PRBS with urinary concentrations of pesticide biomarkers. Urinary concentrations of pesticide biomarkers were positively related to high pesticide FV intake but inversely related to low pesticide FV intake. The molar sum of urinary concentrations of pesticide biomarkers was 21% (95% confidence interval (CI): 2%, 44%) higher for each one serving/day increase in high pesticide FV intake, and 10% (95% CI: 1%, 18%) lower for each one serving/day increase in low pesticide FV intake. Furthermore, intake of high pesticide FVs positively related to most individual urinary biomarkers. Our findings support the usefulness of the PRBS approach to characterize dietary exposure to select pesticides.

Hoy en día, parece existir un consenso sobre la naturaleza multifactorial de los trastornos del espectro autista (TEA). La literatura ofrece hipótesis que tratan numerosos factores ambientales y genes que explicarían la aparente mayor prevalencia de esta condición. Los investigadores han demostrado evidencia sobre el impacto de las bacterias intestinales en los resultados neurológicos, alterando el comportamiento y potencialmente afectando el inicio y/o la gravedad de los trastornos psiquiátricos. Los pesticidas y agroquímicos también se incluyen entre esta larga lista de factores estresantes ambientales relacionados con el TEA. Cabe destacar que la ingestión de glifosato (GLY), un herbicida sistémico de amplio espectro, puede reducir las bacterias beneficiosas en la microbiota del tracto gastrointestinal sin ejercer efectos sobre la población de Clostridium, que es altamente resistente a este herbicida. En el presente estudio, (i) realizamos una revisión sistemática para evaluar la relación entre las bacterias del género Clostridium y la probabilidad de desarrollar y/o empeorar el autismo en niños. Para ello, se realizaron búsquedas electrónicas en las bases de datos Medline/PubMed y Scielo para identificar estudios relevantes publicados en inglés hasta diciembre de 2017. Dos investigadores independientes seleccionaron los estudios y analizaron los datos. Los resultados de la presente revisión sistemática demuestran una interrelación entre la colonización de las bacterias del género Clostridium en el tracto intestinal y el autismo. Finalmente, (ii) también planteamos una hipótesis sobre cómo los niveles ambientales de GLY podrían influir perjudicialmente en el eje intestino-cerebro al potenciar el crecimiento de las bacterias del género Clostridium en niños autistas.

Nowadays, there seems to be a consensus about the multifactorial nature of autism spectrum disorders (ASD). The literature provides hypotheses dealing with numerous environmental factors and genes accounting for the apparently higher prevalence of this condition. Researchers have shown evidence regarding the impact of gut bacteria on neurological outcomes, altering behavior and potentially affecting the onset and/or severity of psychiatric disorders. Pesticides and agrotoxics are also included among this long list of ASD-related environmental stressors. Of note, ingestion of glyphosate (GLY), a broad-spectrum systemic herbicide, can reduce beneficial bacteria in the gastrointestinal tract microbiota without exerting any effects on the Clostridium population, which is highly resistant to this herbicide. In the present study, (i) we performed a systematic review to evaluate the relationship between Clostridium bacteria and the probability of developing and/or aggravating autism among children. For that purpose, electronic searches were performed on Medline/PubMed and Scielo databases for identification of relevant studies published in English up to December 2017. Two independent researches selected the studies and analyzed the data. The results of the present systematic review demonstrate an interrelation between Clostridium bacteria colonization of the intestinal tract and autism. Finally, (ii) we also hypothesize about how environmental GLY levels may deleteriously influence the gut–brain axis by boosting the growth of Clostridium bacteria in autistic toddlers.

Un creciente cuerpo de investigación sugiere que la disbiosis de la microbiota intestinal inducida por contaminantes ambientales, como los pesticidas, podría desempeñar un papel en el desarrollo de trastornos metabólicos. Hemos examinado los efectos a largo plazo de tres dosis del herbicida Roundup(R) (compuesto por glifosato y formulantes) en la microbiota intestinal de ratas Sprague-Dawley macho y hembra. Un total de 141 familias de bacterias fueron identificadas mediante un análisis de secuenciación 16S. Un análisis OPLS-DA reveló un aumento en la familia Bacteroidetes S24-7 y una disminución en Lactobacillaceae en 8 de las 9 hembras tratadas con las 3 diferentes dosis de R (n = 3 para cada dosis). Estos efectos fueron confirmados por análisis repetitivos de huella dactilar PCR que mostraron una agrupación de las hembras tratadas. Un método basado en cultivos mostró que R tuvo un efecto directo en la microbiota intestinal de las ratas. Las especies cultivables mostraron diferentes sensibilidades a R, incluida la presencia de una cepa de Escherichia coli altamente tolerante o resistente identificada mediante secuenciación de ARNr 16S. La alta tolerancia de esta cepa de E. coli se explicó por la ausencia del gen EPSPS (que codifica la enzima diana del glifosato) como se mostró mediante amplificación de ADN. En general, estas alteraciones en el microbioma intestinal mostraron una superposición sustancial con las asociadas con disfunción hepática en otros estudios. En conclusión, revelamos que una concentración ambiental de R (0.1 ppb) y otras dos concentraciones (400 ppm y 5,000 ppm) tienen un impacto dependiente del sexo en la composición del microbioma intestinal de las ratas y, por lo tanto, requieren una investigación adicional.

A growing body of research suggests that dysbiosis of the gut microbiota induced by environmental pollutants, such as pesticides, could have a role in the development of metabolic disorders. We have examined the long-term effects of 3 doses of the Roundup(R) herbicide (made of glyphosate and formulants) on the gut microbiota in male and female Sprague-Dawley rats. A total of 141 bacteria families were identified by a 16S sequencing analysis approach. An OPLS-DA analysis revealed an increased Bacteroidetes family S24-7 and a decreased Lactobacillaceae in 8 out of the 9 females treated with 3 different doses of R (n = 3, for each dose). These effects were confirmed by repetitive sequence-based PCR fingerprinting showing a clustering of treated females. A culture-based method showed that R had a direct effect on rat gut microbiota. Cultivable species showed different sensitivities to R, including the presence of a high tolerant or resistant strain identified as Escherichia coli by 16S rRNA sequencing. The high tolerance of this E. Coli strain was explained by the absence of the EPSPS gene (coding glyphosate target enzyme) as shown by DNA amplification. Overall, these gut microbiome disturbances showed a substantial overlap with those associated with liver dysfunction in other studies. In conclusion, we revealed that an environmental concentration of R (0.1 ppb) and other two concentrations (400 ppm and 5,000 ppm) have a sex-dependent impact on rat gut microbiome composition and thus warrants further investigation.

Los pesticidas y herbicidas ganaron popularidad debido a la imperiosa necesidad de frenar la hambruna de miles de millones de seres humanos. El glifosato es el herbicida más comúnmente utilizado y era considerado por no ser tóxico. Pero su uso excesivo en tierras agrícolas ha contaminado suelos y aguas. Hoy en día, los residuos de glifosato se han encontrado em suelo, agua y alimentos. Como resultado, el glifosato causa graves efectos toxicológicos agudos y crónicos. Revisamos los efectos toxicológicos del glifosato y sus metabolitos sobre organismos del reino animal, tanto organismos unicelulares como multicelulares, Los efectos adversos sobre los organismos unicelulares han estado establecidos en muchos experimentos. Por ejemplo, el glifosato ha reducido el rango de fotosíntesis en Euglena ha disminuido el crecimiento radial de especies de hongos micorrízicos y también está reduciendo la profusión de ciertas bacterias presentes en las comunidades microbianas rizosféricas. El glifosato también representa una seria amenaza para los organismos multicelulares. Sus efectos toxicológicos han sido rastreados desde los invertebrados inferiores hasta los vertebrados superiores. Sus efectos se han observado en anélidos (gusanos de tierra), artrópodos (crustáceos e insectos), moluscos, equinodermos, peces, reptiles, anfibios y aves. Los efectos toxicológicos como la genotoxicidad, citotoxicidad, aberración nuclear, alteración hormonal, aberraciones cromosómicas y daño al ADN en vertebrados superiores como los humanos.

Pesticides and herbicides gained popularity due to a strong need to curb the starvation of billions of humans. Glyphosate is the most commonly used herbicide and was considered to be non-toxic. But its use in excess in agricultural lands has polluted soils and waters. Nowadays, glyphosate residues are found in soil, water and food. As a result glyphosate causes severe acute and chronic toxicological effects. We review toxicological effects of glyphosate and metabolites on organisms of the kingdom animalia, both unicellular and multicellular organisms. Adverse effects on unicellular organisms have been established in many experiments. For instance, glyphosate has reduced the rate of photosynthesis in Euglena, has decreased the radial growth of mycorrhizal fungal species and is also reducing the profusion of certain bacteria present in rhizospheric microbial communities. Glyphosate poses serious threat to multicellular organisms as well. Its toxicological effects have been traced from lower invertebrates to higher vertebrates. Effects have been observed in annelids (earthworms), arthropods (crustaceans and insects), mollusks, echinoderms, fish, reptiles, amphibians and birds. Toxicological effects like genotoxicity, cytotoxicity, nuclear aberration, hormonal disruption, chromosomal aberrations and DNA damage have also been observed in higher vertebrates like humans.

El uso de plaguicidas en la agricultura mexicana genera interés por conocer la presencia de estas sustancias en diferentes matrices ambientales. El glifosato (GLY) es un herbicida de amplio uso en el estado de Campeche, ubicado en la zona maya del occidente de la península de Yucatán. A pesar de que el GLY es considerado un plaguicida no tóxico para los humanos, su presencia en cuerpos de agua a través de derrames, escorrentías y lixiviación son un riesgo para la salud humana o la biota que habita en estos ecosistemas. En el presente estudio se determinaron residuos de glifosato en aguas subterráneas, agua potable embotellada y orina de agricultores de subsistencia de diversas localidades del municipio de Hopelchén en Campeche. La determinación de GLY se llevó a cabo utilizando un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA). Las concentraciones más altas de GLY se observaron en muestras de agua subterránea (1,42 μg/L) de Ich-Ek y orina (0,47 μg/L) de agricultores de subsistencia de las comunidades de Francisco J. Mújica. Las concentraciones de glifosato en aguas subterráneas y agua potable embotellada indican una exposición y un uso excesivo de glifosato en estas comunidades agrícolas. Este es uno de los primeros estudios que reporta niveles de concentración de glifosato en orina humana y agua potable embotellada en México y en aguas subterráneas en la Península de Yucatán como parte de un estudio piloto prospectivo, al cual se le dará seguimiento para monitorear esta tendencia con el tiempo.

The use of pesticides in Mexican agriculture creates an interest in learning about the presence of these substances in different environmental matrices. Glyphosate (GLY) is an herbicide widely used in the state of Campeche, located in the Mayan zone in the western Yucatan peninsula. Despite the fact that GLY is considered a non-toxic pesticide to humans, its presence in water bodies through spillage, runoff, and leaching are a risk to human health or biota that inhabit these ecosystems. In the present study, glyphosate residues were determined in groundwater, bottled drinking water, and the urine of subsistence farmers from various localities of the Hopelchén municipality in Campeche. Determination of GLY was carried out using Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA). The highest concentrations of GLY were observed in the groundwater (1.42 μg/L) of Ich-Ek and urine (0.47 μg/L) samples of subsistence farmers from the Francisco J. Mújica communities. The glyphosate concentrations in groundwater and bottled drinking water indicate an exposure and excessive use of glyphosate in these agricultural communities. This is one of the first studies that reports glyphosate concentration levels in human urine and bottled drinking water in México and in the groundwater in the Yucatan Peninsula as part of a prospective pilot study, to which a follow-up will be performed to monitor this trend over time.

Esta investigación se realizó en el municipio de Bahía Solano, Colombia y tuvo como objetivos: 1) detectar la circulación de eritrocitos con lesiones nucleares en 55 hembras adultas de tortuga golfina (Lepidochelys olivacea), empleando la inmunotinción de naranja de acridina y 2) correlacionar sus frecuencias con aspectos biométricos y fisiológicos. Se determinó una frecuencia de eritrocitos con micronúcleos (EMN) de 0,6 ± 0,6 y de protuberancias nucleares (EPN) de 2,1 ± 1,9. Mediante un análisis multivariado a través de la correlación de Pearson y de Kruskal-Wallis (p0,05), no se encontró ninguna correlación positiva entre el nivel de frecuencia de EPN ni de EMN con los parámetros biométricos y fisiológicos evaluados. Se estableció una diferencia estadísticamente significativa (p= 0,035) entre las frecuencias de EPN y de EMN. Los resultados hallados indican que esta especie presenta eritrocitos circulantes con los daños nucleares mencionados y reporta por primera vez la presencia de estrés genotóxico para la especie en Colombia. Así mismo, brinda información clave para investigaciones posteriores en el área de la ecotoxicología de especies marinas amenazadas.

This research was conducted in the municipality of Bahia Solano, Colombia, and had as a goal to detect damage erythrocytes circulating with nuclear lesions in fifty-five Olive Ridley adult females using acridine orange immunostain, and correlate its frequencies with some physiological and biometric parameters. We determine a micronucleated erythrocytes (MNE) frequency of 0.6 ± 0.6 and nuclear buds (NBE) of 2.1 ± 1.9. We not found any relationship between the nuclear lesions with physiological or biometric parameters evaluated (Pearson and Kruskal-Wallis, p0.05). We define a significative statistical difference (p=0.035) between both nuclear lesions frequencies. This results show nuclear damages in erythrocytes of Olive Ridley sea turtle for the first time in Colombia as an outcome of genotoxic stress. Also contributes key information for future research in the ecotoxicology area for endangered marine species.

El herbicida de amplio espectro glifosato (N-[fosfonometil]-glicina) y su principal metabolito, el ácido aminometilfosfónico (AMPA), fueron analizados por GC-MS-MS en muestras de orina de 24 horas criopreservadas por el Banco Alemán de Especímenes Ambientales (ESB, por sus siglas en inglés). Se seleccionaron muestras recolectadas en 2001, 2003, 2005, 2007, 2009, 2011, 2012, 2013, 2014 y 2015 para este análisis retrospectivo. Todas las muestras de orina habían sido proporcionadas por individuos de 20 a 29 años de edad que vivían en Greifswald, una ciudad del noreste de Alemania. De las 399 muestras de orina analizadas, 127 (= 31,8%) contenían concentraciones de glifosato iguales o superiores al límite de cuantificación (LOQ) de 0,1 μg/L. En el caso del AMPA, esto se observó en 160 muestras (= 40,1%). La fracción de niveles de glifosato iguales o superiores al LOQ alcanzó su punto máximo en 2012 (57,5%) y 2013 (56,4%) después de haber aumentado discontinuamente desde un 10,0% en 2001. Las tasas de cuantificación fueron nuevamente más bajas en 2014 y 2015, con un 32,5% y un 40,0%, respectivamente. La tendencia general para los niveles cuantificables de AMPA fue similar. Las concentraciones de glifosato y AMPA en la orina estuvieron correlacionadas de manera estadísticamente significativa (coeficiente de correlación de rango de Spearman = 0,506, p ≤ 0,001). Los niveles urinarios de glifosato y AMPA tendieron a ser más altos en los hombres. La posible reducción en la exposición desde 2013, indicada por los datos del ESB, puede deberse a cambios en la aplicación de glifosato en la práctica agrícola. El ESB continuará monitoreando las exposiciones internas a glifosato y AMPA para seguir la tendencia temporal, elucidar las diferencias interindividuales y contribuir al debate en curso sobre la regulación adicional de los pesticidas a base de glifosato.

The broadband herbicide glyphosate (N-[phosphonomethyl]-glycine) and its main metabolite aminomethylphosphonic acid (AMPA) were analyzed by GC-MS-MS in 24 h-urine samples cryo-archived by the German Environmental Specimen Bank (ESB). Samples collected in 2001, 2003, 2005, 2007, 2009, 2011, 2012, 2013, 2014, and 2015 were chosen for this retrospective analysis. All urine samples had been provided by 20 to 29 years old individuals living in Greifswald, a city in north-eastern Germany. Out of the 399 analyzed urine samples, 127 (= 31.8%) contained glyphosate concentrations at or above the limit of quantification (LOQ) of 0.1 μg/L. For AMPA this was the case for 160 (= 40.1%) samples. The fraction of glyphosate levels at or above LOQ peaked in 2012 (57.5%) and 2013 (56.4%) after having discontinuously increased from 10.0% in 2001. Quantification rates were lower again in 2014 and 2015 with 32.5% and 40.0%, respectively. The overall trend for quantifiable AMPA levels was similar. Glyphosate and AMPA concentrations in urine were statistically significantly correlated (spearman rank correlation coefficient = 0.506, p ≤ 0.001). Urinary glyphosate and AMPA levels tended to be higher in males. The possible reduction in exposure since 2013 indicated by ESB data may be due to changes in glyphosate application in agricultural practice. The ESB will continue monitoring internal exposures to glyphosate and AMPA for following up the time trend, elucidating inter-individual differences, and contributing to the ongoing debate on the further regulation of glyphosate-based pesticides.

Kalach 360 SL (KL) es un herbicida comercial que contiene 360 g/l de glifosato utilizado tanto en áreas agrícolas como urbanas en todo el mundo, incluido Túnez. Nuestro objetivo fue evaluar los efectos de KL en el sistema renal de ratas. Las ratas Wistar hembra se dividieron en tres grupos: el grupo 1 (n = 6) recibió una dieta estándar y sirvió como control, los grupos 2 y 3 (n = 12 cada uno) recibieron 0.07 ml (D1: 126 mg/kg), y 0.175 ml (D2: 315 mg/kg) de KL, respectivamente, durante 60 d. La exposición crónica a KL indujo un aumento significativo en los niveles plasmáticos de creatinina, urea y ácido úrico. El aclaramiento de creatinina disminuyó en los grupos tratados con KL, en comparación con los controles. Varios parámetros de la orina, como la gravedad específica de la orina y la osmolalidad de la orina, disminuyeron significativamente, mientras que la diéresis y la proporción urinaria de Na/K + aumentaron en los grupos tratados con KL. Estos hallazgos sugirieron un daño tubular distal causado por necrosis tubular. Además, la exposición crónica a KL indujo un aumento en la peroxidación lipídica (LPO) y una disminución en el estado antioxidante, las actividades enzimáticas (superóxido dismutasa y catalasa) y los niveles no enzimáticos (vitamina C), lo que condujo a un estrés oxidativo. Los estudios histopatológicos mostraron reacción inflamatoria peritubular, nefrosis, glomérulos fragmentados, células epiteliales necróticas y dilatación tubular. Estos resultados podrían tener importantes implicaciones para la salud de las poblaciones animales y humanas. Se necesitan más datos para investigar las posibles consecuencias de la exposición crónica a dosis durante la vida.

Kalach 360 SL (KL) is a commercial herbicide which contains 360 g/l of glyphosate used in both agricultural and urban areas throughout the world including Tunisia. We aimed to evaluate the effects of KL on rats’ renal system. Female Wistar rats were divided into three groups: group 1 (n = 6) received a standard diet and served as control, groups 2 and 3 (n = 12 each) received 0.07 ml (D1: 126 mg/kg), and 0.175 ml (D2: 315 mg/kg) of KL, respectively, for 60 d. The chronic exposure to KL induced a significant increase in plasma creatinine, urea, and uric acid levels. Creatinine clearance decreased in KL-treated groups, compared with controls. Several urine parameters, such as urine-specific gravity and urine osmolality, significantly decreased, while dieresis and urinary Na/K + ratio increased in KL-treated groups. These findings suggested a distal tubular damage caused by tubular necrosis. Moreover, the chronic exposure to KL induced an increase in lipid peroxidation (LPO) and a decrease in antioxidant status, enzymatic activities (superoxide dismutase and catalase) and non-enzymatic levels (vitamin C), which led to an oxidative stress. Histopathological studies showed a peritubular inflammatory reaction, nephrose, fragmented glomeruli, necrotic epithelial cells, and tubular dilatation. These results could have significant health implications for animal and human populations. Further data are necessary to investigate the potential consequences of chronic dose exposure during life.

Este estudio describe la validación y aplicación de dos métodos analíticos independientes para la determinación de glifosato en leche materna. Se basan en cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS) y cromatografía de gases-espectrometría de masas en tándem (GC-MS/MS), respectivamente. Para LC-MS/MS, la preparación de la muestra implicó una ultrafiltración seguida de una cromatografía en una columna de intercambio aniónico. El análisis por GC-MS/MS involucró un paso de extracción, limpieza en una columna de intercambio catiónico y derivatización con heptafluorobutanol y anhídrido de ácido trifluoroacético. Ambos métodos se desarrollaron recientemente para la leche materna y pueden cuantificar los residuos de glifosato en concentraciones tan bajas como 1 ng/mL. Los métodos se aplicaron para cuantificar los niveles de glifosato en 114 muestras de leche materna, que se recolectaron entre agosto y septiembre de 2015 en Alemania. Las madres participaron por su propia solicitud y por lo tanto no forman una muestra representativa. En ninguna de las muestras investigadas se encontraron residuos de glifosato por encima del límite de detección.

This study describes the validation and application of two independent analytical methods for the determination of glyphosate in breast milk. They are based on liquid chromatography−tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) and gas chromatography−tandem mass spectrometry (GC-MS/MS), respectively. For LC-MS/MS, sample preparation involved an ultrafiltration followed by chromatography on an anion exchange column. The analysis by GC-MS/MS involved an extraction step, cleanup on a cation exchange column, and derivatization with heptafluorobutanol and trifluoroacetic acid anhydride. Both methods were newly developed for breast milk and are able to quantify glyphosate residues at concentrations as low as 1 ng/mL. The methods were applied to quantify glyphosate levels in 114 breast milk samples, which had been collected from August to September of 2015 in Germany. The mothers participated at their own request and thus do not form a representative sample. In none of the investigated samples were glyphosate residues above the limit of detection found.